細(xì)胞免疫檢測(cè)法
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細(xì)胞免疫檢測(cè)法(assays of cellular immunity)，檢測(cè)參與免疫應(yīng)答的各種細(xì)胞（即免疫細(xì)胞）的數(shù)量和功能的方法。免疫細(xì)胞包括各類白細(xì)胞和它們的前體細(xì)胞。血液中的白細(xì)胞是成熟的免疫細(xì)胞的代表，可按形態(tài)分為淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞（在組織中轉(zhuǎn)變成巨噬細(xì)胞）、嗜中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和漿細(xì)胞等?；?，淋巴細(xì)胞又可藉表面特征和功能的不同再分為 T細(xì)胞、B細(xì)胞、K細(xì)胞(殺傷細(xì)胞)和NK細(xì)胞（自然殺傷細(xì)胞）等。除血液外，大部分免疫細(xì)胞分布于身體各免疫器官中。各類免疫細(xì)胞都從骨髓造血干細(xì)胞分化而來，只有 T細(xì)胞在胸腺中成熟，其余細(xì)胞都在骨髓中成熟。免疫細(xì)胞成熟以后，被分送到血液、脾臟、淋巴結(jié)或其他淋巴組織行使功能。正常情況下，各免疫器官所含各類免疫細(xì)胞的數(shù)量和相互比例有一定的正常值范圍，其分布有一定的解剖學(xué)區(qū)域，如T細(xì)胞分布于脾臟和淋巴結(jié)的胸腺依存區(qū)、 B細(xì)胞分布于脾臟和淋巴結(jié)的非胸腺依存區(qū)。各類免疫細(xì)胞的正常含量與分布是維持免疫系統(tǒng)正常生理功能的基礎(chǔ)。各類免疫細(xì)胞能單獨(dú)或聯(lián)合地對(duì)各種外來的、內(nèi)生的不利于身體的大分子物質(zhì)或細(xì)胞產(chǎn)生適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)，將它們解毒、殺死、吞噬、消化，最后清除體外，以維持身體的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，便于正常生理活動(dòng)的進(jìn)行。由于免疫系統(tǒng)或其他系統(tǒng)的疾病，由于免疫接種或某些臨床治療措施，由于某些外界環(huán)境因素的影響，免疫細(xì)胞的數(shù)量和功能均可發(fā)生變化。這些變化又能引起身體其他生理功能的異常，或?qū)е赂鞣N新的繼發(fā)性病變。因此進(jìn)行細(xì)胞免疫檢測(cè)，對(duì)于某些疾病的診斷和其發(fā)病機(jī)理的分析，對(duì)某些免疫接種或治療措施的效果評(píng)估，對(duì)某些環(huán)境因素對(duì)免疫細(xì)胞影響的研究等方面，都具有重要的意義。細(xì)胞免疫的檢測(cè)方法很多，內(nèi)容、目的及方法的難易程度有很大的不同，必須根據(jù)自己的目的和條件選用適當(dāng)?shù)姆椒ā３Ｓ玫募?xì)胞免疫檢測(cè)方法如下。
免疫細(xì)胞的數(shù)量檢測(cè)
正常情況下，身體各部分各類免疫細(xì)胞的含量與分布保持相對(duì)穩(wěn)定。任何疾病或異常原因打亂免疫細(xì)胞的新生與破損死亡兩過程的平衡，即可造成這些細(xì)胞數(shù)量與分布的變化。表1列出不同原因引起的免疫細(xì)胞數(shù)量變化的發(fā)生部位及細(xì)胞的特性。
各種原因引起的免疫細(xì)胞數(shù)量變化表現(xiàn)多數(shù)都在血液中有所反映。所以，血液是細(xì)胞免疫檢測(cè)法最常選用的樣品，只有在必要時(shí)，才從骨髓或其他免疫器官取材檢查。
①血液白細(xì)胞計(jì)數(shù)。是醫(yī)院最常用的化驗(yàn)檢查項(xiàng)目之一，實(shí)際上就是血液中總的白細(xì)胞濃度的測(cè)定。成人血中白細(xì)胞濃度的正常值為4000～10000個(gè)/mm3。新生兒的正常值較成人高，為11000～20000個(gè)/mm3。血液白細(xì)胞計(jì)數(shù)是診斷的依據(jù)。若白細(xì)胞計(jì)數(shù)異常，則需要作白細(xì)胞分類等檢查（見血液常規(guī)檢查）。
②血液中白細(xì)胞的分類計(jì)數(shù)。正常人體血液中各類白細(xì)胞的數(shù)量有一定的比例。表2示其特征。
在異?；蚣膊∏闆r下，不管白細(xì)胞總數(shù)是否發(fā)生改變，各類白細(xì)胞之間相對(duì)數(shù)量的百分率都可能發(fā)生變化。這些變化是診斷的依據(jù)之一。血中白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)方法比較簡(jiǎn)單，屬于醫(yī)院的常規(guī)化驗(yàn)檢查項(xiàng)目。取一滴血，在載玻片上做成涂片，經(jīng)固定染色，即可在顯微鏡下觀察。數(shù)100個(gè)細(xì)胞，計(jì)算每一類白細(xì)胞的百分率。
③血中T細(xì)胞與B細(xì)胞的分類計(jì)數(shù)。在正常人血中，T細(xì)胞與B細(xì)胞的數(shù)目分別占淋巴細(xì)胞總數(shù)的65～80％和5～15％。若兩類細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)發(fā)生變化，應(yīng)根據(jù)淋巴細(xì)胞總數(shù)來判斷這種變化是絕對(duì)數(shù)還是相對(duì)數(shù)變化引起的。在進(jìn)行血中T細(xì)胞和B細(xì)胞分類計(jì)數(shù)時(shí)，大量紅細(xì)胞和粒細(xì)胞的存在給檢測(cè)帶來很大的不便，所以需要將淋巴細(xì)胞從血中分離出來，再根據(jù)T細(xì)胞和B細(xì)胞的表面標(biāo)記不同，對(duì)提純的淋巴細(xì)胞作T細(xì)胞和B細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)測(cè)定。
不同血細(xì)胞的密度有差別，淋巴細(xì)胞較輕，比重低于1.077，紅細(xì)胞、粒細(xì)胞和血小板較重，比重高于1.077。若將加有抗凝劑的血放到比重為 1.077的細(xì)胞分離液表面上，將裝液體的試管離心，紅細(xì)胞、粒細(xì)胞和血小板均沉于細(xì)胞分離液之下到達(dá)管底，而淋巴細(xì)胞和少量單核細(xì)胞浮在細(xì)胞分離液之上。取出浮在上面的淋巴細(xì)胞，即可作T細(xì)胞與B細(xì)胞百分?jǐn)?shù)的檢測(cè)。
人的T細(xì)胞表面有綿羊紅細(xì)胞(SRBC)的受體，因此可與綿羊紅細(xì)胞結(jié)合。若將分離提純的淋巴細(xì)胞與過量的SRBC混合，經(jīng)過離心使細(xì)胞緊密接觸。在室溫或4℃冰箱放置一段時(shí)間后，將細(xì)胞重新混懸起來，滴一滴細(xì)胞懸液在玻片上做成壓片，在顯微鏡下觀察。淋巴細(xì)胞可成為中心包繞三個(gè)以上SRBC，形成細(xì)胞集團(tuán)，形如一個(gè)花環(huán)（圖1）。因紅細(xì)胞的英文字(erythrocyte)第一個(gè)字母是E，所以稱這種細(xì)胞集團(tuán)為E-花環(huán)。E-花環(huán)中心的淋巴細(xì)胞就是 T細(xì)胞，不結(jié)成花環(huán)的散在淋巴細(xì)胞為非 T細(xì)胞。將結(jié)花環(huán)和不結(jié)花環(huán)的淋巴細(xì)胞分別計(jì)數(shù)，累計(jì)100或200個(gè)淋巴細(xì)胞即可得知淋巴細(xì)胞中含T細(xì)胞和非T細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)。
人的T細(xì)胞表面有CD3抗原，B細(xì)胞表面有表面免疫球蛋白。將分離提純的淋巴細(xì)胞用抗CD3的抗體作免疫熒光“染色”可使 T細(xì)胞帶上熒光物質(zhì)；用抗免疫球蛋白的抗體“染色”可以使 B細(xì)胞帶上熒光物質(zhì)。帶上熒光物質(zhì)的細(xì)胞在一定波長的激發(fā)光作用下可以產(chǎn)生熒光，用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞計(jì)數(shù)器，可鑒別發(fā)熒光與不發(fā)熒光的細(xì)胞，并能分類計(jì)數(shù)。因此，對(duì)提純的淋巴細(xì)胞分別用CD3抗體或抗免疫球蛋白的抗體作免疫熒光染色，就可以進(jìn)行淋巴細(xì)胞中含T細(xì)胞或B細(xì)胞百分?jǐn)?shù)的檢測(cè)。這種方法比E-花環(huán)形成試驗(yàn)的結(jié)果要準(zhǔn)確一些。
人的 T細(xì)胞中帶CD4抗原的細(xì)胞稱T4細(xì)胞，帶CD8抗原的細(xì)胞稱T8細(xì)胞。T4與T8細(xì)胞組成T細(xì)胞的兩亞類，分別表現(xiàn)不同的免疫功能。在正常人，T4細(xì)胞數(shù)多于T8細(xì)胞數(shù)，兩者的比例約為2:1，在有些疾病中，其比例可發(fā)生變化。獲得性免疫缺陷綜合征時(shí)人免疫缺陷病毒侵犯T4細(xì)胞，引起T4細(xì)胞減少，可出現(xiàn)T4細(xì)胞與T8細(xì)胞比例倒置(小于1)的現(xiàn)象。對(duì)T4和T8細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法，與對(duì)T細(xì)胞和B細(xì)胞的計(jì)數(shù)方法相似，可用抗CD4的抗體或抗CD8的抗體，分別對(duì)提純的淋巴細(xì)胞或T細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光染色，再用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)。
免疫細(xì)胞的功能檢測(cè)
在自然條件下，免疫細(xì)胞的功能都是在體內(nèi)完成的。但在進(jìn)行免疫細(xì)胞功能檢查時(shí)，主要采用體外實(shí)驗(yàn)的方法。其基本過程是，從待檢查者分離欲檢測(cè)的細(xì)胞，用適當(dāng)?shù)拇碳の锘騿渭兊?a href="/w/%E8%90%A5%E5%85%BB%E6%B6%B2" title="營養(yǎng)液">營養(yǎng)液與細(xì)胞一起培養(yǎng)，觀測(cè)細(xì)胞發(fā)生的與體內(nèi)功能有關(guān)的反應(yīng)性變化。根據(jù)所用刺激物的性質(zhì)不同，可將試驗(yàn)分為特異性反應(yīng)功能和非特異反應(yīng)功能檢測(cè)兩類。
①淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)。是淋巴細(xì)胞功能檢測(cè)最基本的方法。淋巴細(xì)胞平常在未受到刺激時(shí)，處于相對(duì)的代謝靜止?fàn)顟B(tài)。在體外培養(yǎng)的淋巴細(xì)胞受到某些刺激物的作用后，經(jīng)過3～5天，可發(fā)生形態(tài)學(xué)的變化，胞漿增多，胞核擴(kuò)大，繼而出現(xiàn)有絲分裂。這些變化稱為淋巴母細(xì)胞樣轉(zhuǎn)化現(xiàn)象或淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)。在淋巴細(xì)胞發(fā)生母細(xì)胞樣轉(zhuǎn)化的過程中，細(xì)胞的蛋白質(zhì)、RNA和DNA的合成都增加，出現(xiàn)代謝活化現(xiàn)象。因此，在進(jìn)行淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)時(shí)，可用形態(tài)學(xué)的方法或生物化學(xué)的方法來檢測(cè)試驗(yàn)結(jié)果。淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)可根據(jù)所用刺激物的不同分為三種。一為促有絲分裂素引起的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化反應(yīng)。促有絲分裂素為一些來自植物或微生物的糖蛋白或多糖物質(zhì)，能非特異地作用于正常人的淋巴細(xì)胞，引起淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化反應(yīng)。適用于人的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)的促有絲分裂素有五種，即植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA)、美洲商陸 (PWM)、金黃色葡萄球菌CowanⅠ株(SAC)、乙型副傷寒桿菌 (SPB)。它們引起T細(xì)胞和B細(xì)胞轉(zhuǎn)化的能力有不同。檢測(cè)之前，各實(shí)驗(yàn)室需測(cè)定正常人 T細(xì)胞和B細(xì)胞轉(zhuǎn)化反應(yīng)的均值與正常范圍，作為比較的標(biāo)準(zhǔn)。
特異性抗原引起的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化反應(yīng)。在正常人體內(nèi)能與某一種特異抗原結(jié)合的淋巴細(xì)胞在全體淋巴細(xì)胞中只占很小的比例，約為幾十萬分之一。所以正常人的淋巴細(xì)胞幾乎不能對(duì)抗原發(fā)生可測(cè)的轉(zhuǎn)化反應(yīng)。人體接受某種抗原的刺激后，能與相應(yīng)抗原結(jié)合的淋巴細(xì)胞在體內(nèi)發(fā)生活化和增殖，轉(zhuǎn)變?yōu)閿?shù)量較多對(duì)抗原反應(yīng)明顯的致敏淋巴細(xì)胞。因此，受過抗原刺激的人，其淋巴細(xì)胞含有較多的致敏淋巴細(xì)胞，在體外與特導(dǎo)抗原一起培養(yǎng)便可發(fā)生淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化反應(yīng)?？乖鸬牧馨图?xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)，在于檢測(cè)人體是否已經(jīng)接受過某種抗原的刺激。
混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng) (MLC)反應(yīng)。是將組織相容性抗原（ HLA抗原）不同的兩個(gè)人的淋巴細(xì)胞放在一起培養(yǎng)時(shí)，發(fā)生的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化現(xiàn)象。在MLC反應(yīng)中，T細(xì)胞是反應(yīng)細(xì)胞，HLA抗原不同的異體B細(xì)胞是刺激細(xì)胞。如果二人的HLA抗原完全相同，則不會(huì)發(fā)生MLC反應(yīng)，或者稱為MLC反應(yīng)陰性。在某些疾病時(shí)，T細(xì)胞的免疫功能下降，病人對(duì)HLA抗原不同的人淋巴細(xì)胞發(fā)生MLC反應(yīng)的能力也減弱。
②淋巴因子產(chǎn)生試驗(yàn)。淋巴細(xì)胞在受到各種刺激后發(fā)生代謝的活化，同時(shí)可產(chǎn)生并釋放多種有生物學(xué)活性的物質(zhì)，稱為淋巴因子。因此，淋巴因子產(chǎn)生試驗(yàn)與淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)具有相似的意義，用來檢測(cè)淋巴細(xì)胞對(duì)不同刺激物的反應(yīng)能力。較常用的淋巴因子產(chǎn)生試驗(yàn)是白細(xì)胞移動(dòng)抑制因子（或巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子）產(chǎn)生試驗(yàn)。白細(xì)胞移動(dòng)抑制因子和巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子分別能抑制裝在毛細(xì)玻璃管中的白細(xì)胞或巨噬細(xì)胞向管口外移動(dòng)。在作白細(xì)胞（或巨噬細(xì)胞）移動(dòng)抑制因子產(chǎn)生試驗(yàn)時(shí)，一般是用特異性抗原作刺激物，若淋巴細(xì)胞能發(fā)生反應(yīng)釋放白細(xì)胞移動(dòng)抑制因子或巨噬細(xì)胞移動(dòng)因子，說明此人已接受過該抗原的刺激，對(duì)該抗原可表現(xiàn)特異的細(xì)胞免疫反應(yīng)。此試驗(yàn)的結(jié)果，往往與身體對(duì)同一抗原的遲發(fā)型過敏皮膚試驗(yàn)的結(jié)果一致。
③細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗(yàn)。一種細(xì)胞通過直接接觸將另一種細(xì)胞殺傷的現(xiàn)象，稱為細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用。前種細(xì)胞為殺傷細(xì)胞，后種細(xì)胞為靶細(xì)胞。在人體內(nèi)有兩種能直接殺傷靶細(xì)胞的細(xì)胞，即自然殺傷細(xì)胞（NK細(xì)胞）和特異性殺傷 T細(xì)胞（特異性Tc細(xì)胞）。NK細(xì)胞可存在于未受抗原刺激的正常人體，對(duì)某些受感染的細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞或正常的未成熟造血細(xì)胞有殺傷活性。特異性Tc細(xì)胞存在于受過特異抗原刺激的人體內(nèi)，能殺傷帶特異抗原的受感染細(xì)胞、異體細(xì)胞、自身組織細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞。這兩種殺傷細(xì)胞借不同的機(jī)制在抗感染免疫、抗腫瘤免疫、自身免疫病及移植免疫的過程中均有重要意義。兩種殺傷細(xì)胞在體外的功能檢測(cè)，只是所用的靶細(xì)胞各不相同，檢測(cè)的方法都是相同的，常用放射性核素51銘（51Cr）釋放法。此方法的原理是，將靶細(xì)胞預(yù)先用51Cr標(biāo)記，51Cr能與胞漿中的蛋白質(zhì)結(jié)合。靶細(xì)胞標(biāo)記的51Cr量可用γ射線計(jì)數(shù)器測(cè)量其cpm值來表示。靶細(xì)胞與殺傷細(xì)胞混合后經(jīng)過離心，使兩種細(xì)胞壓緊，密切相互作用。培養(yǎng)一段時(shí)間后，被殺傷靶細(xì)胞內(nèi)的51Cr會(huì)釋放到胞外來，可以測(cè)量細(xì)胞培養(yǎng)液中游離51Cr的 cpm值，以表示靶細(xì)胞受破壞的程度(圖2)。因此，可用培養(yǎng)后所測(cè)培養(yǎng)液中的cpm值與靶細(xì)胞標(biāo)記的總 51Cr量的 cpm值之比表示殺傷細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞的殺傷率(又稱 51Cr的特異釋放率)。靶細(xì)胞的51Cr特異釋放率即被殺傷百分率，與殺傷細(xì)胞的數(shù)量與殺傷速度成正相關(guān)，所以可用此測(cè)量結(jié)果作為殺傷細(xì)胞功能強(qiáng)弱的指標(biāo)。
④抗體分泌細(xì)胞的檢測(cè)。分泌抗體的漿細(xì)胞由 B細(xì)胞分化而來，但在此分化過程中，往往需要T細(xì)胞與單核—巨噬細(xì)胞協(xié)作。因此對(duì)抗體分泌細(xì)胞的檢測(cè)，實(shí)際上是對(duì)B細(xì)胞、T細(xì)胞和巨噬細(xì)胞功能的綜合性評(píng)價(jià)。抗體分泌細(xì)胞的檢測(cè)，依抗體的特異性不同，可分為針對(duì)某種抗原的特異抗體分泌細(xì)胞的檢測(cè)，以及無一定特異性的免疫球蛋白分泌細(xì)胞的檢測(cè)?？贵w分泌細(xì)胞的檢測(cè)還可因其產(chǎn)生的條件不同而分為三種方法，其結(jié)果表示的意義也有差別。在自然條件下人體內(nèi)存在的免疫球蛋白(Ig)分泌細(xì)胞，稱為自發(fā)性Ig分泌細(xì)胞。它們反映人體在自然情況下受抗原刺激的情況，并且與年齡的增長有關(guān)。受抗原注射后，在體內(nèi)產(chǎn)生的特異抗體的分泌細(xì)胞，能反映人體的體液免疫應(yīng)答功能。但是，對(duì)人無益的抗原不能輕易給人注射，此方法多用于動(dòng)物試驗(yàn)。取人的淋巴細(xì)胞，在體外培養(yǎng)，經(jīng)過各種刺激，能夠引起非特異性Ig分泌細(xì)胞的產(chǎn)生，稱為體外的抗體產(chǎn)生免疫應(yīng)答。此體外試驗(yàn)對(duì)于分析T細(xì)胞、B細(xì)胞和巨噬細(xì)胞在抗體產(chǎn)生反應(yīng)中的功能作用很有意義?？贵w分泌細(xì)胞的具體檢測(cè)常用溶血空斑技術(shù)，即將待檢細(xì)胞與經(jīng)過處理的綿羊紅細(xì)胞混合，再加入補(bǔ)體及顯斑劑，灌入用兩張玻璃片做成的窄縫狀小室內(nèi)。經(jīng)過37℃培養(yǎng)一段時(shí)間，抗體分泌細(xì)胞周圍的綿羊紅細(xì)胞被溶解，形成一個(gè)圓形的透明區(qū)，稱為溶血空斑?？瞻咧行牡目贵w分泌細(xì)胞又稱為空斑形成細(xì)胞(PFC)。所以抗體分泌細(xì)胞的檢測(cè)也稱PFC的檢測(cè)。
⑤嗜中性粒細(xì)胞吞噬功能的檢測(cè)。血液白細(xì)胞中占比例最大的就是嗜中性粒細(xì)胞，能作較快的變形運(yùn)動(dòng)，有對(duì)異物的吞噬作用。對(duì)嗜中性粒細(xì)胞吞噬功能的檢測(cè)常用形態(tài)學(xué)檢查方法。將抗凝的血1～2ml經(jīng)過離心沉淀，取出壓積細(xì)胞表面的白細(xì)胞層(可混入一些紅細(xì)胞)，將此細(xì)胞與一定數(shù)量的細(xì)菌懸液混合，于37℃培養(yǎng)一段時(shí)間。用低速離心方法洗去白細(xì)胞外的細(xì)菌，將白細(xì)胞作涂片染色，于顯微鏡下觀察。順序觀察100～200個(gè)嗜中性粒細(xì)胞，并記下吞噬細(xì)菌的細(xì)胞數(shù)及被吞噬的細(xì)菌數(shù)。100 個(gè)嗜中性粒細(xì)胞中吞噬細(xì)菌的細(xì)胞數(shù)稱為吞噬百分率。在100個(gè)白細(xì)胞中，平均每個(gè)細(xì)胞吞噬的細(xì)菌數(shù)稱為吞噬指數(shù)。在對(duì)人或動(dòng)物作嗜中性粒細(xì)胞吞噬功能檢測(cè)時(shí)，常需要同時(shí)計(jì)算出吞噬百分率和吞噬指數(shù)以綜合評(píng)價(jià)其吞噬功能。
⑥嗜中性粒細(xì)胞 NBT還原試驗(yàn)。嗜中性粒細(xì)胞在吞噬細(xì)菌或異物后，還需要消化分解異物。這種能力與葡萄糖在細(xì)胞內(nèi)的氧化分解有關(guān)，在葡萄糖氧化脫氫的過程中，可以產(chǎn)生硝基藍(lán)四氮唑(NBT)還原的反應(yīng)。正常人的嗜中性粒細(xì)胞在吞噬異物后，可發(fā)生與消化異物相關(guān)的糖氧化分解反應(yīng)，若在體外遇到NBT，即可使NBT由黃色變成藍(lán)色的顆粒沉積于胞漿內(nèi)。慢性肉芽腫的患者，其吞噬細(xì)胞的吞噬作用表現(xiàn)正常，但對(duì)吞噬的異物缺乏消化分解的能力。用這些人的嗜中性粒細(xì)胞做 NBT還原試驗(yàn)，呈現(xiàn)陰性反應(yīng)，即胞漿中不出現(xiàn)藍(lán)色顆粒，或只有很少的藍(lán)色顆粒。此外，在細(xì)菌感染時(shí)，NBT還原試驗(yàn)呈陽性的吞噬細(xì)胞增加。
⑦巨噬細(xì)胞吞噬功能的測(cè)定。巨噬細(xì)胞是重要的免疫細(xì)胞，具有處理與傳遞抗原、產(chǎn)生白細(xì)胞介素1和其他細(xì)胞因子，以及吞噬異物或異常細(xì)胞的功能。巨噬細(xì)胞功能的檢查在動(dòng)物進(jìn)行的研究較多，在人的研究較少，因?yàn)閺娜梭w獲得巨噬細(xì)胞困難。中國張友會(huì)等人利用含有斑蝥浸出液的濾紙片貼于人的皮膚，引起皮皰，從皮皰液中可得到較多的巨噬細(xì)胞，這為進(jìn)行人的巨噬細(xì)胞的研究提供了方便。巨噬細(xì)胞的體積大、吞噬力強(qiáng)，可用羊或雞的紅細(xì)胞作為吞噬作用的指標(biāo)，檢測(cè)巨噬細(xì)胞的吞噬功能。這比用細(xì)菌作吞噬的指標(biāo)較易觀察結(jié)果。
細(xì)胞免疫功能體內(nèi)測(cè)定技術(shù)
如延緩型皮膚變態(tài)反應(yīng)，又稱（遲發(fā)型超過敏反應(yīng)）包括結(jié)核菌素試驗(yàn)、二硝基氯苯(DNCB)或二硝基氟苯(DNFB)皮膚試驗(yàn)。結(jié)核菌素試驗(yàn)是以不同類型的結(jié)核菌素和不同方法進(jìn)行的皮膚試驗(yàn)，用以診斷結(jié)核病及細(xì)胞免疫缺陷病的參考。試驗(yàn)用舊結(jié)核菌素(OT)或純蛋白衍化物(PPD)，多用將試劑體內(nèi)注射的芒圖氏法。隔一段時(shí)間視局部有無紅暈、硬結(jié)，觀察人體對(duì)結(jié)核菌素有無延緩型變態(tài)反應(yīng)（Ⅳ型）。陽性者表示過去或現(xiàn)在接觸過結(jié)核桿菌，但不一定有活動(dòng)性結(jié)核；陰性表示無結(jié)核感染，結(jié)核感染早期或病情危重、營養(yǎng)極度不良、某些急性傳染病（如麻疹）、惡性腫瘤時(shí)均可表現(xiàn)陰性。給小兒接種卡介苗前應(yīng)先做結(jié)核菌素試驗(yàn)，陰性者方可接種。
二硝基氯苯和二硝基氟苯以致敏劑量涂于前臂，48～72小時(shí)后局部可見紅暈、硬結(jié)乃至大皰、潰瘍，表現(xiàn)似結(jié)核菌素試驗(yàn)，這也是延緩型變態(tài)反應(yīng)。正常人多呈陽性，但細(xì)胞免疫缺陷者反應(yīng)減低或?yàn)殛幮?。此法用于測(cè)定腫瘤患者的細(xì)胞免疫功能。但因該試劑副作用大，現(xiàn)已很少用。
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