放射免疫分析
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放射免疫分析（英文：Radioimmunoassay，RIA），又稱為放射免疫分析法、放射免疫測(cè)定或放射免疫測(cè)定法，簡稱放免或放免法，是一種在無須采用生物測(cè)定方法的情況下用于檢測(cè)抗原（例如，血清之中激素的水平）的實(shí)驗(yàn)室測(cè)定方法。這一方法是由羅莎琳·薩斯曼·耶洛和Solomon Aaron Berson于二十世紀(jì)50年代創(chuàng)建的[1]。1977年，耶洛因?yàn)榻?a href="/w/%E8%83%B0%E5%B2%9B%E7%B4%A0" title="胰島素">胰島素的RIA檢測(cè)方法而獲得諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)：在內(nèi)分泌學(xué)領(lǐng)域，當(dāng)時(shí)認(rèn)為對(duì)于此類微量激素的精確測(cè)定乃是一種突破。
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基本原理
RIA的基本原理為：放射性同位素標(biāo)記的抗原（簡稱“標(biāo)記抗原”）和非標(biāo)記抗原（標(biāo)準(zhǔn)抗原或待測(cè)抗原）同時(shí)與數(shù)量有限的特異性抗體之間發(fā)生競爭性結(jié)合（抗原－抗體反應(yīng)）。由于標(biāo)記抗原與待測(cè)抗原的免疫活性完全相同，對(duì)特異性抗體具有同樣的親和力，當(dāng)標(biāo)記抗原和抗體為數(shù)量恒定時(shí)，待測(cè)抗原和標(biāo)記抗原的總量大于抗體上的有效結(jié)合點(diǎn)時(shí)，標(biāo)記抗原-抗體復(fù)合物的形成將隨著待測(cè)抗原量的增加而減少，而非結(jié)合的或游離的標(biāo)記抗原則隨著待測(cè)抗原數(shù)量的增加而增加（也就是所謂的競爭結(jié)合反應(yīng)），因此測(cè)定標(biāo)記抗原-抗體或標(biāo)記抗原即可推出待測(cè)抗原的數(shù)量。
抗原的放射性標(biāo)記常常是利用碘發(fā)射γ射線的放射性同位素與酪氨酸結(jié)合來實(shí)現(xiàn)的。病人血清等標(biāo)本之中所含的是未經(jīng)放射性標(biāo)記的抗原（亦可稱為“冷”抗原），即待測(cè)抗原?？傮w上來說，特異性抗體之上抗原結(jié)合部位的數(shù)量是有限的。相對(duì)有限的抗原結(jié)合部位而言，標(biāo)記抗原與待測(cè)抗原之間屬于競爭關(guān)系。通過繪制結(jié)合曲線，即可計(jì)算出病人血清之中待測(cè)抗原的確切數(shù)量。
在采用這種方法的時(shí)候，結(jié)合抗原與非結(jié)合抗原之間的分離至關(guān)重要。最初，為了沉淀和離心抗原－抗體反應(yīng)所形成的免疫復(fù)合物，分離方法采用的是針對(duì)第一抗體的第二抗體。后來，在對(duì)T3和T4進(jìn)行RIA測(cè)定時(shí)，哥倫比亞大學(xué)的Werner和Acebedo對(duì)RIA方法進(jìn)行了擴(kuò)展，采用活性炭懸濁液進(jìn)行沉淀[2]。1975年，Acebedo和Hayek等人在BBRC之上發(fā)表了人TSH的超微量RIA法[3]。
優(yōu)缺點(diǎn)
RIA技術(shù)極其敏感而又極其特異，但其卻需要具備尖端復(fù)雜的設(shè)備，且成本也不低。同時(shí)，RIA還需要特殊的預(yù)防措施，因?yàn)槠湟玫?a href="/w/%E6%94%BE%E5%B0%84%E6%80%A7%E7%89%A9%E8%B4%A8" title="放射性物質(zhì)">放射性物質(zhì)。因此，如今RIA在很大程度上已經(jīng)被ELISA所取代。就ELISA而言，抗原－抗體反應(yīng)的測(cè)定采用的是顏色變化信號(hào)，而不是放射性信號(hào)。
參考文獻(xiàn)
- ↑ Yalow RS, Berson SA. Immunoassay of endogenous plasma insulin in man. J Clin Invest 1960;39:1157-75. PMID 13846364.
- ↑ Werner SC, Acebedo G, Radichevich I. Rapid radioimmunoassay for both T4 and T3 in the same sample of human serum. J. Clin. Endocrinol. Metab.. 1974, 38 (3): 493–5. PMID 4815178.
- ↑ Acebedo G, Hayek A, Klegerman M, Crolla L, Bermes E, Brooks M. A rapid ultramicro radioimmunoassay for human thyrotropin. Biochem. Biophys. Res. Commun.. 1975, 65 (2): 449–56. doi:10.1016/S0006-291X(75)80168-9. PMID 1148002.
參見
外部鏈接
- MeSH（醫(yī)學(xué)主題詞）上面的Radioimmunoassay
- Radioimmunoassay- procedure
- http://www.lib.mcg.edu/edu/esimmuno/ch4/radassay.htm
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參考來源
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