基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)/血漿凝血酶原時(shí)間測(cè)定
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［原理］在抗凝血漿中，加入足夠量的組織凝血活酶（組織因子，TF）和適量的鈣離子，即可滿(mǎn)足外源凝血的全部條件。從加入鈣離子到血漿凝固所需在的時(shí)間即稱(chēng)為血漿凝血酶原時(shí)間。PT的長(zhǎng)短反映了血漿中凝血酶原、纖維蛋白原和因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的水平。
［方法學(xué)評(píng)價(jià)］ 一步法凝血酶原時(shí)間測(cè)定：由Quick在1935年創(chuàng)建。該法是在抗凝血漿中直接加入試劑一次完成測(cè)定，因此稱(chēng)一步法。當(dāng)時(shí)認(rèn)為該試驗(yàn)只反映了凝血酶原的活性（因子未發(fā)現(xiàn)凝血因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ）。原使用草酸鈉液作為抗凝劑，后來(lái)發(fā)現(xiàn)此液不利于凝血因子和保存，故已改用枸櫞酸鈉作抗凝劑。一步法PT常用靜脈抗凝血普通試管法手工測(cè)定；也有用毛細(xì)血管微量抗血測(cè)定，雖采血量少，但操作較繁瑣，故少用；也可用表面玻皿法測(cè)定，準(zhǔn)確性較并管法高，而操作不如后者簡(jiǎn)便。近年來(lái)，多采用半自動(dòng)或全自動(dòng)血液凝固儀測(cè)定，也以出現(xiàn)纖維蛋白絲作為終點(diǎn)。
手工法雖重復(fù)性差、耗時(shí)，但仍有相當(dāng)程度的準(zhǔn)確性，故仍廣泛應(yīng)用，其中以手工傾斜試管法為參考方法。半自動(dòng)儀法，提高了光天化日確度和速度，但存在標(biāo)本交叉污染的缺點(diǎn)。全自動(dòng)儀法克服了半自動(dòng)儀法不足之處，使檢測(cè)更加精確、快速、敏感與方便。
組織凝血活酶試劑質(zhì)量是影響PT測(cè)定準(zhǔn)確性最重要的因素之一。組織凝血活酶的不同來(lái)源，不同制備方法，使務(wù)實(shí)驗(yàn)室之間及每批試劑之間PT測(cè)定的結(jié)果差異大，可比性差，特別影響對(duì)口服抗凝血?jiǎng)?/a>患者治療效果的判斷，因此早在1967年，WHO就將功贖罪67/40批號(hào)人腦凝血活酶標(biāo)準(zhǔn)品，作為以后制備不同來(lái)源的血活酶的參考物，并要求計(jì)算和提供每批組織凝血活酶的國(guó)際敏感指數(shù)。ISI表示標(biāo)準(zhǔn)品組織凝血活酶與每批組織凝血活酶PT校正曲線的斜率，即在雙對(duì)數(shù)的坐標(biāo)紙上，縱坐標(biāo)為用標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定的PT對(duì)數(shù)值，橫坐標(biāo)為用待校正的組織凝血活酶測(cè)定的相同標(biāo)本PT的對(duì)數(shù)值。60/40的ISI為1.0。ISI值越低，表示試劑愈敏感。目前務(wù)國(guó)大體是用國(guó)示標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)化自己制備的本國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品。新的組織凝血活酶標(biāo)準(zhǔn)品來(lái)自兔或牛的制備。其它各種組織凝血活酶劑的ISI必須按照新的標(biāo)準(zhǔn)品ISI進(jìn)行校正。其次，WHO等國(guó)際的要威機(jī)構(gòu)還要求，PT正常對(duì)照值必需至少來(lái)自20名以上男女各半的混合血漿所測(cè)定得結(jié)果。并且還規(guī)定姨口服抗凝劑的患者必須使用國(guó)際PT結(jié)果報(bào)告形成，并用以為抗凝治療監(jiān)護(hù)的指標(biāo)，INR=（病人凝血酶原時(shí)間/正常人平均凝血酶原進(jìn)間）ISI。作PT測(cè)定時(shí)，首先應(yīng)了解所用的組織凝積壓活酶試劑的ISI，ISI值通常由產(chǎn)生試劑的廠商提供的，測(cè)定PT后，即可計(jì)算出INR。為使用方便，INR也可從制造商提供的圖表中查提，最初規(guī)定INR必須使用手工法測(cè)得，在引入自動(dòng)化凝血儀后，為了不影響INR的可靠性，制造商還應(yīng)提供儀器相應(yīng)的ISI值。使用ISi 和INR可減少或去除各實(shí)驗(yàn)室PT測(cè)定的在技術(shù)和試劑上差異，使抗凝療法監(jiān)測(cè)過(guò)程中，各種PT結(jié)果有可比性。
近年，國(guó)外用重組組織因子作為PT測(cè)定。γ-TF比其它動(dòng)物性來(lái)源的漲血活酶對(duì)凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅹ敏感性高，但目前未被推廣使用。
一步法PT結(jié)果報(bào)告方法：一般情況下，可同時(shí)報(bào)告被檢標(biāo)本PT和正常對(duì)照PT以及PT比率。凝血酶原比率=被檢血漿PT時(shí)間/正常血漿PT時(shí)間。過(guò)去曾用凝血酶原活動(dòng)度報(bào)告，現(xiàn)已少用；當(dāng)PT用于監(jiān)測(cè)口服抗凝劑時(shí)，則必須同時(shí)報(bào)告INR值。
二步法凝原時(shí)間測(cè)定：首先由Warner等創(chuàng)建，后由Ware/Seegers等改良，此法第一步生成凝血酶，第二步是測(cè)定生成的凝血酶，從而間接測(cè)得凝血酶原時(shí)間。二步法雖然雙較合理，但操作繁瑣，未被廣泛應(yīng)用。
［參考值］ 一步法凝血酶原時(shí)間：11～13s
凝血酶原比值：0.82～1.15
［臨床意義］
1．PT延長(zhǎng)：PT超過(guò)正常對(duì)照3秒以上或凝血酶原比值超過(guò)正常范圍即為延長(zhǎng)，主要見(jiàn)于：①先天性因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ減少及纖維蛋白原的缺乏（低或無(wú)纖維蛋白血癥）；②獲得性凝血因子缺乏，如DIC、原發(fā)性纖溶亢進(jìn)癥、肝病的阻塞性黃疸和維生素K缺乏、血循環(huán)中抗凝物質(zhì)增多等。
2．PT縮短：①先天性因子Ⅴ增多；②DIC早期（高凝狀態(tài)）；③口服避孕藥、其它血栓前狀態(tài)及血栓性疾病（凝血因子和血小板活性增高，血管損傷等無(wú)法為血栓形成的基礎(chǔ)）。
3．口服抗凝藥的監(jiān)護(hù)臨床上當(dāng)NIR為2-4時(shí)為抗凝治療的合適范圍，當(dāng)INR>4.5時(shí)，如纖維蛋白水平和血小板數(shù)仍正常，則提示抗凝過(guò)度，應(yīng)三少或停止用藥。INR>4.5時(shí)，同時(shí)伴有纖維蛋白原和血小板減低，則右能是DIC或肝病等所致也應(yīng)減少或停止口服抗凝劑。
 復(fù)鈣時(shí)間測(cè)定 | 活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定  |
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